最新农业生物技术专利

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关键词:启动子、镉吸收、育性、草甘膦、新Cas蛋

1、启动子

华中农业大学申请的专利6(发明人:王功伟;程慧雅;付湘逵;杨万能;冯慧)涉及OsFGH5基因hap2型启动子在调控水稻光化学效率中的应用,包括在调控水稻光化学效率自然变异中的应用。通过对OsFGH5基因进行单倍型分析,显示该基因在启动子区域存在多态性,启动子区域的多态性会造成启动子活性差异,进而造成表达量差异。通过测定近等基因系的叶绿素荧光参数来研判该基因hap2型启动子的功能及在调控水稻光化学效率中的应用。OsFGH5基因所表达的蛋白定位于水稻叶绿体中,与叶绿体ATP合酶CF1β 的II2区域相互作用,帮助β 与α 组装成α/β异源二聚体,参与CF1亚复合体组装过程。该基因在调控水稻光化学效率中具有的重要育种价值。

齐鲁师范学院申请的专利1(发明人:束德峰;崔大勇;刘婧;郭宁;张雪倩;张宗慧)公开了一种源于拟南芥的热响应启动子及其应用,该启动子对高温胁迫信号可以高效响应。本发明通过RNA测序筛选出受高温高效诱导表达的基因,克隆其启动子序列,将该启动子序列构建入含GUS标签的载体中用以转化拟南芥,提高作物耐高温能力。

深圳大学申请的专利X(发明人:刘琳;赵俊伊;何娟;莫蓓莘;陈雪梅)涉及一种玉米根部特异性表达的启动子ZmREG1pro及其应用。本发明的玉米根部特异性表达的启动子ZmREG1pro能够启动目的基因在植物根部进行特异性地表达。

2、分子检测方法

武汉艾迪晶生物科技有限公司申请的专利8(发明人:谢先荣;王高华;廖明义;袁珏慧)公开一种批量快速检测DNA序列突变的方法。本方法基于桥接PCR,经2轮PCR反应,将多个样本基因组DNA中的特定位点扩增后,进行混合建库测序的方法,批量对DNA序列中的突变进行鉴定,获取具体的突变序列。本方法的检测的突变位点适用于任何物种的DNA,包括二倍体和多倍体物种;可以检出多种突变类型;简化了扩增步骤,通过浓度非对称的2对引物对,在第二轮扩增中同时进行样本的标识和加入建库接头序列;第二轮扩增使用的4条引物可用于多次实验,无需重复合成,其成本主要来自 特异扩增的引物和测序成本,且当混合的样品数量越多时,其成本越低。

中国农业科学院生物技术研究所申请的专利1、1、5、0(发明人:宛煜嵩;孟丽霞)分别涉及转基因玉米双抗、转基因玉米DBN、转基因水稻B2A、转基因水稻EBS6的RPA检测引物与探针组合、试剂盒及检测方法。本发明根据外源插入DNA序列与受体基因组的连接区域设计大量RPA引物,从中筛选出可快速有效检测出转基因成分的引物探针组合。以转化体基因组DNA为模板,利用筛选出的引物探针组合进行RPA扩增及实时荧光检测,具有速度快、特异性好、灵敏度高的特点。

3、麦类作物

中国农业科学院作物科学研究所申请的专利8(发明人:李甜;柳洪;王雅美;郑*;郝晨阳;张学勇)公开了一种小麦TaCCT16A蛋白在调控作物抽穗期中的应用。本发明发现转基因过表达TaCCT16A可显著延迟小麦抽穗期。

河北农业大学申请的专利0(发明人:李在峰;闫晓翠;李淼淼;张培培;殷贵鸿;刘志勇;刘大群)具体公开一种小麦抗叶锈病蛋白及其编码基因和应用。所述小麦抗叶锈病蛋白具有提高小麦抗叶锈病功能,在小麦中提高该小麦抗叶锈病蛋白的表达量能够显著提高小麦对叶锈病的抵抗能力。

山东省农业科学院作物研究所申请的专利8(发明人:李玮;宋国琦;李根英;李玉莲;张淑娟;张荣志;李吉虎;高洁)提供一种提高dcaps标记检测效率的方法。该提高dcaps标记检测效率的方法,包括以下步骤:S1、选取目的基因序列:提取已知小麦抗叶锈基因Lr67和其野生型病感基因,S2、dCAPS引物设计:提取S1中小麦抗叶锈基因Lr67配合dCAPSFinder2.0设备制备正常序列长度引物,S3、引物序列长度扩增:将S2中制备引物进行一定序列长度扩增。该提高dcaps标记检测效率的方法,在dCAPS在引物中引入酶切位点,引物的长度一般为20bp左右,因此PCR酶切后产生比原来短20bp左右片段,要区分20bp的片段差异一般需采用聚 凝胶电泳来分离,本发明在引物5’端加上30bp以上的尾巴序列,使酶切后野生型和突变体的片段大小差异增加到50bp以上。

中国科学院成都生物研究所申请的专利4(发明人:陈静;张紫晋;肖春生;粟永英;任益明;江迪;杨婷)涉及一种可鉴定大麦籽粒糯性的KASP分子标记及其应用。具体技术方案为一种引物组合物,包括正向引物AL1、正向引物AL2、反向引物C。本发明针对大麦Waxy基因第10个外显子的SNP位点G/T提供了一种功能性KASP分子标记,能对糯性基因进行准确分型。

山东省农业科学院作物研究所和烟台大学申请的专利9(发明人:刘成;计健;马朋涛;李根英;刘任糠;朱姗颖;何华纲)公开了3个特异追踪拟斯卑尔脱山羊草6SS染色体的分子标记(6SS1~6SS3)及其用法。这些分子标记不仅能追踪来源于拟斯卑尔脱山羊草的Pm12基因,也能追踪来源于簇毛麦的Pm21基因,在聚合育种材料中可同时区分并追踪Pm12基因和Pm21基因,在辅助选择育种及两个基因的聚合育种中具有重要的实用价值。

山东农业大学申请的专利7(发明人:刘树兵;燕强;庞昀龙;刘春霞;王丹峰;路悦)公开了一组(23个)与小麦抗寒性显著关联的SNP位点及其在遗传和育种中的应用方法。这些标记是通过对份小麦品种和优良品系种进行简化基因组测序(GBS)并比对参考基因组序列鉴定出来的,SNP位点准确性好,这些位点可用于转化成单个的SNP标记(如KASP标记)和SNP芯片,用于小麦抗寒基因的定位、精细作图和候选基因克隆,以及小麦抗寒性的标记辅助选择、基因聚合及全基因组选择育种。

4、镉吸收

中国科学院植物研究所申请的专利2(发明人:何振艳;冯璐;许文秀;闫慧莉)公开了一种玉米籽粒镉含量相关基因ZmCd9中的单倍型分子标记及应用。本发明通过检测待测玉米品种中的镉含量基因ZmCd9中单倍型组合的单倍型发现,含有单倍型ZmCd9Hap4的玉米品种籽粒镉含量均值显著高于其他单倍型,82.75%的单倍型ZmCd9Hap4(ATG)的玉米品种中籽粒镉含量均高于0.1mg/kg,表明ZmCd9Hap4单倍型分子标记可用于玉米分子标记辅助选择育种,显著提高玉米低镉积累品种的选择效率。

湖南杂交水稻研究中心申请的专利5(发明人:唐丽;赵炳然;孙远涛;董家瑜;李曜魁;吕启明)公开了一种调控稻米镉积累的基因OsABCG38。OsABCG38基因主要在水稻的根系表达,敲除OsABCG38基因使水稻植株根系、秸秆和糙米的镉含量均显著下降,且对主要农艺性状无显著影响,表明OsABCG38基因正调控水稻镉积累。与转空载体的酵母对照相比,表达OsABCG38基因的酵母对Cd胁迫更敏感且镉含量更高。本发明还公开了该基因OsABCG38或其编码蛋白在改良水稻镉积累特性或培育镉低积累水稻品种中的应用,操作简单,改良和培育新品种的周期短,且不影响主要农艺性状。

上海市农业科学院申请的专利2(发明人:韩红娟;姚泉洪;彭日荷)公开了一种来源于葡萄的ABC转运蛋白基因mrp1S及其制备方法和应用。该mrp1S基因是将来源于葡萄的ABC转运蛋白基因MRP1利用基因合成方法制备而成。将所述mrp1S基因转化拟南芥获得转基因拟南芥,该转基因拟南芥在耐镉的性能方面明显优于野生型拟南芥;所以所述mrp1S基因可应用于耐镉植物育种中。

5、草甘膦

武汉天问生物科技有限公司申请的专利4(发明人:凌飞;刘宝红)提供一种抗草甘膦转基因大豆的培育方法。所述培育方法中,构建包含目标基因I.variabilisEPSPS*基因的载体pTWGM1,将含有表达载体pTWGM1的农杆菌菌株与大豆子叶节外植体进行侵染与共培养后,经草甘膦的筛选诱导丛生芽,再诱导芽伸长至3cm左右时,生根培养获得转基因T0代幼苗。在T0代植株生长期间,通过筛选阳性植株,并通过Southernblot鉴定阳性植株的拷贝数,对单拷贝植株进行收种。在T1代,转基因植株分家系进行种植,通过田间观察,喷施草甘膦,挑选草甘膦耐受性好且农艺性状无明显改变的转基因家系。

中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所申请的专利4(发明人:王淼;王静;佘永新)本发明公开了一种基于EPSP合酶与GFP融合蛋白检测草甘膦的快速检测方法,包括克隆的草甘膦主要靶点EPSP合酶作为草甘膦的受体蛋白;将受体蛋白与绿色荧光蛋白进行融合,构建了EPSPSGFP这一既含有草甘膦结合部位,又带有荧光标记的新蛋白,在大肠杆菌中原核表达纯化,将其用于水中的草甘膦检测。本发明通过构建融合蛋白采用荧光光度计检测荧光响应值的变化,建立标准校正曲线,实现对草甘膦除草剂的定性定量检测。

马来西亚金农有限公司申请的专利8(发明人:李金才;吴文达;洪均怡)涉及用于改善除草剂、细菌和真菌抗性以及提供增强的农艺性状的重组基因,该重组基因的特征在于包含 EPSPS基因和第二EPSPS基因的核酸,其中重组基因与编码转录因子的基因融合。特别地, EPSPS从根癌农杆菌CP4获得,第二EPSPS基因从水稻获得,编码转录因子的基因是水稻WRKY45。

6、育性

海南波莲水稻基因科技有限公司申请的专利5(发明人:李燕群;李佳林;龙湍;罗凡;刘功鹏;曾翔;吴永忠)涉及一种水稻核雄性不育保持系的选育方法。具体涉及将通过基因工程手段获得的核雄性不育保持系,利用杂交、分子标记和表型选择(株叶形态、异交结实、苯达松敏感、双草醚抗性、花粉育性、荧光等)相结合的方法转育至其他遗传背景的水稻材料,从而创制新的水稻核雄性不育保持系。本发明提供的选育方法可批量化、规模化选育水稻核雄性不育保持系,并进一步繁殖出水稻核雄性不育系。

华中农业大学申请的专利7(发明人:汪华栋;魏超;沈金雄;易斌;傅廷栋)公开了一种甘蓝型油菜hauCMS育性恢复基因Rfh及其应用。本发明首次从甘蓝型油菜中筛选得到甘蓝型油菜hauCMS不育系的恢复基因Rfh。将该恢复基因Rfh导入至甘蓝型油菜hauCMS不育系植株中,可恢复不育系植株的育性,以用于创制新型hauCMS恢复系,从而增加了hauCMS恢复系遗传系统的多样性;同时本发明还提供了其等位基因rfh,和特异性扩增恢复基因Rfh和等位基因rfh的扩增引物,该引物可根据扩增片段大小区分恢复基因Rfh或等位基因rfh,进而对甘蓝型油菜hauCMS的三系育种系统进行区分,因此可作为分子标记进行辅助育种。

华中农业大学申请的专利2(发明人:康春颖;冯佳;程来超)具体提供了一种LAM基因,并提供了LAM基因在调控草莓器官发育中的应用、通过改变LAM基因使其无法行使功能获得草莓雄性不育系的方法及试剂盒。

本发明在森林草莓EMS突变体库中发现一株雄蕊缺失引起雄性不育的突变体lossofaxillarymeristems(lam),同时其匍匐茎的形成受到抑制。通过精细的基因定位,找到了突变体的致突变基因,并通过CRISPR/Cas9技术介导的基因编辑技术获得该基因的突变体,重现lam突变体的表型,进一步确认LAM基因的功能。使用该方法获得的草莓雄性不育系,在草莓育种过程中,可以直接作为母本应用,省去了繁琐的人工去雄过程。同时获得的草莓植株的匍匐茎形成受到抑制,基本不产生匍匐茎,开花后,不需要人工去除匍匐茎,有利于花序生成和坐果。




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